Informazioni di Base.
Model No.
KA15901H
Uso specifico
Per Finalità biologica, Grado tecnico, Pro Analisi
Contenuto
Confronto
Uso
Reagenti diagnostici
Fonte
Reagenti importati
Habit Denominazione
Medicina chimica
Applicazione
Industria, Ricerca scientifica, Salute, Protezione ambientale, Agricoltura
Proprietà
Reagenti organici
Pacchetto di Trasporto
scatola in espanso
Specifiche
10 test
Marchio
kwinbon
Origine
Repubblica Popolare Cinese
Codice SA
38229000
Capacità di Produzione
5200000kit all′anno
Descrizione del Prodotto
Kit per immunodosaggio enzimatico competitivo per
Analisi quantitativa di Matrine e Oxymatrine (MT&OMT)
Analisi quantitativa di Matrine e Oxymatrine (MT&OMT)
1. Sfondo
Matrine e Oxymatrine (MT&OMT) appartengono agli alcaloidi picrici, una classe di insetticidi alcaloidi vegetali con effetti di avvelenamento del tatto e dello stomaco, e sono biopticidi relativamente sicuri. All'inizio del 2021, i paesi dell'UE hanno ripetutamente notificato che l'Oxymatrine è stata rilevata nel miele esportato dalla Cina e che i prodotti a base di miele sono stati rifiutati di entrare nel paese. Pertanto, è necessario monitorare il contenuto di questo farmaco.
Questo kit è una nuova generazione di prodotti per la rilevazione dei residui di farmaci sviluppati dalla tecnologia ELISA, che ha i vantaggi di una sensibilità rapida, semplice, precisa ed elevata rispetto alla tecnologia di analisi strumentale, e il tempo di funzionamento è di soli 75 minuti, che può minimizzare l'errore di funzionamento e l'intensità di lavoro.
2. Principio di prova
Questo prodotto adotta il metodo ELISA a competizione indiretta, l'antigene di accoppiamento è pre-rivestito sulla striscia di microtitolazione della piastra enzimatica, Il Matrine e l'Oxymatrine residui nel campione competeranno con l'antigene di accoppiamento pre-rivestito sulla striscia di microtitolazione della piastra enzimatica per l'anticorpo di Matrine e Oxymatrine. Dopo aver aggiunto il coniugato enzimatico, il colore verrà sviluppato con il substrato di TMB, il valore di assorbanza del campione e il suo contenuto dei residui Matrine e Oxymatrine saranno negativamente correlati e quindi confrontabili con la curva standard, E poi moltiplicare il numero di diluizioni per i corrispondenti residui, che possono essere derivati dal corrispondente contenuto di Matrine e Oxymatrine residui .
3. Applicazioni
Questo kit può essere utilizzato per l'analisi quantitativa e qualitativa di Matrine e Oxymatrine nel miele.
4. Reazioni crociate
Matrine............................. …100%
Oxymatrine…......................... …82%
Sophocarpine............. …........... …122%
Sophoridine............................ 78%
5. Materiali richiesti
5.1 Attrezzature:
Spettrofotometro per piastre Microtiter (450 nm/630 nm)
----omogeneizzatore (o stomacher)
----scuotitore
----miscelatore Vortex
----centrifuga
----Bilancia analitica (induttanza: 0.01g)
Provetta per centrifuga in polistirene: 2 ml, 10 ml
Micropipette ----20 ul-200 ul,
100 ul-1000ul, 250 ul-multipipetta
5.2 reagenti:
----acqua deionizzata
6. Componenti del kit
- Piastra per microtitolazione con 96 pozzetti rivestita con antigene
- Soluzioni standard MT&OMT×5 flaconi: (1 ml/flacone)
0 ppb, 0,2 ppb, 0,6 ppb, 1,8 ppb, 5,4 ppb
- Soluzione standard di spiking: (1 ml/flacone) 1 ppm
- Enzima coniugato 12 ml tappo rosso
- Soluzione anticorpale da 7 ml, .....................green CAP
- Soluzione di substrato A 7 ml ......…....tappo bianco
- Soluzione di substrato B 7 ml ….…..….......…tappo rosso
- Arrestare la soluzione 7 ml ......… tappo giallo.…...…........
- 20× di soluzione di lavaggio concentrata 40 ml
- 2× diluizione del campione concentrato 50 ml
7. Preparazione dei reagenti:
Soluzione 1: Diluizione del campione
Diluire il campione di 2×con acqua deionizzata nel rapporto in volume di 1:1.
Soluzione 2: Soluzione di lavaggio
Diluire la soluzione di lavaggio concentrata da 20× con acqua deionizzata nel rapporto in volume di 1:19, che verrà utilizzato per lavare la piastra. Questa soluzione può essere conservata a 4ºC per 1 mese.
8. Preparazione del campione
8.1 Avviso e precauzioni prima dell'uso:
(A) utilizzare puntali una tantina nel processo di esperimento e cambiare i puntali quando si assorbono reagenti diversi.
b) accertarsi che tutti gli strumenti sperimentali siano puliti.
c) il reagente derivato può essere conservato a 2 8ºC per un anno;
d) conservare i campioni non trattati in congelamento;
8.2 campione di miele
Pesare 1.0±0,05 g del campione in una provetta di polistirene da 10 ml;
Aggiungere 2 ml di acqua deionizzata, vortex per 5 minuti con un vortex
----prelevare 50 μL in una provetta per centrifuga da 2 ml in polistirene e aggiungere 450 μL di soluzione diluita ( soluzione 1) del campione e miscelare accuratamente.
----prendere 50 μL per il saggio
9. Processo di saggio
9.1 Avviso prima del dosaggio:
9.1.1 assicurarsi che tutti i reagenti e i micropozzetti siano a temperatura ambiente (20 25ºC).
9.1.2 restituire tutti i reagenti a riposo a 2 8ºC immediatamente dopo l'uso.
9.1.3 il corretto lavaggio dei micropozzetti è un passaggio importante nel processo di analisi; è il fattore vitale per la riproducibilità dell'analisi ELISA.
9.1.4 evitare la luce e coprire i micropozzetti durante l'incubazione.
9.2 fasi del dosaggio:
9.2.1 estrarre tutti i reagenti a temperatura ambiente (20 25ºC) per più di 30 minuti, agitare delicatamente prima dell'uso.
9.2.2 estrarre i micropozzetti necessari e restituire immediatamente il resto nel sacchetto con chiusura a zip a 2 8ºC.
9.2.3 la soluzione di lavaggio diluita deve essere portata a temperatura ambiente prima dell'uso.
9.2.4 numero: Numerato ogni posizione micropozzetti e tutti gli standard e i campioni devono essere analizzati in duplicato. Registrare le posizioni degli standard e dei campioni.
9.2.5 aggiungere soluzione standard/campione e soluzione anticorpale: Aggiungere la soluzione standard o la soluzione campione 50μl al pozzetto corrispondente. Aggiungere 50 ul di soluzione anticorpale per pozzetto, miscelare delicatamente agitando manualmente la piastra e incubare per 30 min 25ºC con coperchio.
9.2.6 Lavare: Rimuovere delicatamente il coperchio e versare il liquido dai pozzetti e sciacquare i micropozzetti con soluzione di lavaggio diluita da 250µl (soluzione 2) a intervalli di 10 secondi per 5 volte. Assorbire l'acqua residua con carta assorbente.
9.2.7 aggiungere il coniugato enzimatico: Aggiungere 100ul di
Coniugato enzimatico per pozzetto, miscelare delicatamente agitando manualmente la piastra e incubare per 30 minuti 25ºC con coperchio. Rimuovere e ripetere il lavaggio (punto 6).
9.2.8 colorazione: Aggiungere la soluzione A e 50µl la soluzione B a ciascun pozzetto. 50µl Miscelare delicatamente agitando manualmente la piastra e incubare per 15 minuti a 25ºC con coperchio (vedere 12.7).
9.2.9 misura: Aggiungere 50µl della soluzione di arresto in ciascun pozzetto. Miscelare delicatamente agitando manualmente la piastra e misurare l'assorbanza a 450 nm (si consiglia di misurare con la doppia lunghezza d'onda di 450/630 nm). Leggere il risultato entro 5 minuti dall'aggiunta della soluzione di arresto).
10. Risultati
10.1% di assorbanza
I valori medi dei valori di assorbanza ottenuti per gli standard e i campioni vengono divisi per il valore di assorbanza del primo standard (standard zero) e quindi moltiplicati per il 100%. Lo standard zero viene quindi reso pari al 100% e i valori di assorbanza vengono riportati in percentuale.
=
B --assorbanza dello standard (o del campione)
B0 --assorbanza dello standard zero (0 ppb)
10.2 curva standard
----per tracciare una curva standard: Prendere il valore di assorbanza degli standard come asse y, semi logaritmico della concentrazione della soluzione di standard MT&OMT (ppb) come asse x.
----la concentrazione di MT&OMT di ciascun campione (ppb), che può essere letta dalla curva di calibrazione, viene moltiplicata per il corrispondente fattore di diluizione di ciascun campione seguito e si ottiene la concentrazione effettiva del campione.
Nota:
È stato sviluppato un software per l'analisi dei dati, che può essere fornito su richiesta.
Fattore di diluizione dei campioni............... …..30
11. Sensibilità, precisione e precisione
Sensibilità test: 0,2 ppb
Limite di rilevamento.................. …..... 10 ppb
Precisione:
Miele...…......................... …100±30%
Precisione:
Il coefficiente di variazione del kit ELISA è inferiore al 10%.
12. Avviso
12.1 i valori medi dei valori di assorbanza ottenuti per gli standard e i campioni saranno ridotti se i reagenti e i campioni non sono stati regolati a temperatura ambiente (20-25ºC).
12.2 non lasciare asciugare i micropozzetti tra una fase e l'altra per evitare una riproducibilità non riuscita e azionare il passaggio successivo immediatamente dopo aver toccato il supporto per micropozzetti.
12.3. Agitare delicatamente ciascun reagente prima dell'uso.
12.4 non utilizzare i kit non aggiornati. Non sostituire i reagenti di lotti diversi, altrimenti la sensibilità diminuisce.
12.5 conservare i kit ELISA a 2 8ºC, non congelare. Sigillare le piastre a pozzetti a riposo, evitando la luce solare diretta durante tutte le incubazioni. Si consiglia di coprire le piastre di microtitolazione.
La soluzione di substrato 12.6 deve essere abbandonata se diventa di colore. I reagenti potrebbero non essere adatti se il valore di assorbanza (450/630 nm) dello standard zero è inferiore a 0.5 (A450 nm<0.5).
12.7 la reazione di colorazione richiede 15 minuti dopo l'aggiunta della soluzione A e della soluzione B; tuttavia, se il colore è troppo chiaro, è possibile prolungare il tempo di incubazione a 20 minuti o più., non superare mai 25 minuti, al contrario, accorciare il tempo di incubazione in modo appropriato.
12.8 la temperatura di reazione ottimale è di 25ºC. Una temperatura più alta o più bassa può determinare variazioni dei valori di sensibilità e assorbanza.
13. Condizioni di conservazione e periodo di conservazione
Condizioni di conservazione: 2-8ºC.
Periodo di conservazione: 12 mesi.